叶绿体单线态氧信号新通路

光合自养生长是植物有别于动物的一个本质特征。在自养生长建成之前，高等植物需经历一个短暂的由种子提供养分的异养生长阶段，异养生长到自养生长的转变依赖于叶绿体发育与叶绿素合成，光照作为环境因子在其中扮演着关键角色。叶绿体是一个半自主细胞器并具有自身基因组，在发育过程中或胁迫情况下，叶绿体会启动反馈信号与细胞核保持“沟通协调”，以确保自养生长的顺利建立。研究认为单线态氧是叶绿体内的一种反馈信号分子，但是，单线态氧的寿命只有微秒级，关于它如何启动和传递信号的机制还不清楚。

中科院植物所林荣呈研究组在前期工作中揭示了四类光信号关键因子可以调控叶绿素合成和单线态氧发生。然而，光与单线态氧信号如何整合并协调叶绿体发育仍是未解之谜。PIFs转录因子是光信号的关键调控因子，研究人员通过正向遗传筛选pif1 pif3的抑制子，克隆获得两个目标基因GUN5和GUN4，它们编码定位于叶绿体的镁螯合酶H亚基及调控因子。GUN4或GUN5功能部分缺失使植物幼苗对强光不敏感并且自养生长建成较快。研究人员进而发现GUN4/GUN5与单线态氧信号组分EX1/EX2相互作用，其互作在黑暗条件下最强，光照和单线态氧信号可以减弱它们的互作强度。通过遗传学、细胞生物学和生物化学等手段，研究人员进一步发现并证明了光照和单线态氧能诱导EX1蛋白由叶绿体快速转移至细胞核，并通过氨基酸定点突变确认了其细胞核定位及其功能。通过启动子序列分析，发现W-box基序在168个EX1靶基因启动子上大量富集，进而证明EX1与WRKY18和WRKY40等转录因子相互作用并调控下游靶基因的表达。同时，EX1具有转录激活活性，表明EX1担当转录调控因子的角色。该工作揭示了GUN4/GUN5-EX1/EX2-WRKYs介导的叶绿体单线态氧反馈信号转导通路，建立了光信号与单线态氧信号的初步联系，确定了EX1蛋白的生化特性，为叶绿体蛋白转移进入细胞核提供了直接证据，也为研究细胞器反馈信号通路提供了新见解。